Plásmido Doble Nickase (h) GAS41: sc-404113-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GAS41 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GAS41 (h) y el plásmido de doble nickasa GAS41 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a YEATS4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GAS41 Anticuerpo (C-10): sc-393708
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GAS41 | sc-404113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GAS41 | sc-404113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YEATS4 codifica GAS41, una proteína nuclear que contiene un dominio YEATS y que actúa como regulador de la transcripción y de la organización del genoma asociado a la cromatina. GAS41 participa en la remodelación de la cromatina y en procesos vinculados a la acetilación de histonas mediante interacciones con complejos como SRCAP/TIP60, apoyando la dinámica de los nucleosomas, el control transcripcional y las respuestas de la cromatina asociadas al daño del ADN. Al influir en la progresión del ciclo celular y en programas de expresión génica, YEATS4/GAS41 se ha relacionado con fenotipos proliferativos y con cambios en el número de copias genómicas descritos en varios tipos de tumores. Estas características convierten a YEATS4 en una diana útil para estudiar la regulación epigenética, la señalización dependiente de la cromatina y las redes transcripcionales relevantes para el cáncer en células humanas.
GAS41 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus YEATS4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de YEATS4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de YEATS4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con YEATS4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.