galectin-8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424987

Descripción general

El gen murino **Lgals8** codifica la galectina-8, una lectina de repetición en tándem que se une a β-galactósidos y reconoce glicanos en proteínas de la superficie celular y de la matriz extracelular para regular la adhesión celular, la migración y la señalización dependiente de integrinas. La galectina-8 actúa como sensor de daño al unirse a glicanos del hospedador expuestos en endomembranas rotas, promoviendo la autofagia selectiva y coordinando respuestas inmunitarias innatas frente al estrés intracelular y la infección. Mediante el entrecruzamiento y la señalización mediadas por lectinas, modula redes de citocinas inflamatorias y la homeostasis celular, intersectando con vías que controlan la endocitosis, la dinámica del citoesqueleto y el tráfico vesicular. La actividad desregulada de la galectina-8 se ha asociado con estados inflamatorios alterados, remodelación relacionada con fibrosis y la biología del microambiente tumoral, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la regulación inmunitaria y la patología tisular en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO galectin-8 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lgals8 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lgals8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lgals8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína galectin-8.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lgals8 para la investigación de la señalización de galectin-8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lgals8 críticos para la función de galectin-8
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lgals8 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido galectin-8 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido galectin-8 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lgals8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR galectin-8 (m) y el plásmido HDR galectin-8 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lgals8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lgals8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.