galectin-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421418

Descripción general

El gen murino **Lgals6** codifica la **galectina-6**, una lectina de unión a β-galactósidos implicada en eventos de reconocimiento dependientes de carbohidratos en la superficie celular y en el entorno extracelular. Como miembro de la familia de las galectinas, la galectina-6 puede influir en las interacciones célula–célula y célula–matriz, en la organización de redes (lattices) de glicoproteínas y en procesos posteriores como la regulación de la barrera epitelial y la señalización de células inmunitarias. Las vías impulsadas por galectinas se relacionan comúnmente con la modulación de la inflamación, el reclutamiento de leucocitos y la remodelación tisular mediante interacciones con receptores glicosilados y componentes de la matriz extracelular. La desregulación de la señalización lectina–glicano se ha asociado con fenotipos inflamatorios y fibróticos en múltiples tejidos, lo que convierte a **Lgals6** en un objetivo relevante para estudios mecanísticos de inmunobiología mucosal y de regulación del microambiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO galectin-6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lgals6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lgals6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lgals6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína galectin-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lgals6 para la investigación de la señalización de galectin-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lgals6 críticos para la función de galectin-6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lgals6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido galectin-6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido galectin-6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lgals6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR galectin-6 (m) y el plásmido HDR galectin-6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lgals6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lgals6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.