Plasmide CRISPR/Cas9 KO FUT2 (h): sc-409559
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FUT2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FUT2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FUT2 Antibody (9T-8): sc-100742
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FUT2 (h) | sc-409559 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
FUT2 code l’α(1,2)-fucosyltransférase 2, une glycosyltransférase résidente de l’appareil de Golgi qui catalyse la fucosylation terminale des glycanes afin de générer les antigènes H de type 1/2 à la surface des épithéliums muqueux et dans les sécrétions. En contrôlant les motifs glycanes fucosylés sur les glycoprotéines et les glycolipides, FUT2 influence le trafic des protéines, les propriétés de barrière épithéliale et les interactions hôte–microbe au niveau des muqueuses intestinales et des voies aériennes. Les variations génétiques et les altérations de l’activité de FUT2 sont liées au statut de sécréteur et aux différences associées des profils de glycosylation muqueuse, qui corrèlent avec la susceptibilité à des phénotypes infectieux et inflammatoires. En tant que régulateur clé des événements de reconnaissance dépendants des glycanes, FUT2 est largement étudié en glycomique, en biologie du microbiome et en immunologie épithéliale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FUT2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FUT2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FUT2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FUT2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FUT2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FUT2 pour l'étude de la signalisation de FUT2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FUT2 essentiels à la fonction de FUT2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FUT2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FUT2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FUT2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FUT2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FUT2 plasmide HDR (h) et le FUT2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FUT2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FUT2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.