Partículas Lentivirales de Activación (h) Furin: sc-400904-LAC

FURIN codifica furina, una convertasa de proproteínas dependiente de calcio que recorre cíclicamente la red trans-Golgi y compartimentos endosómicos para activar por proteólisis diversos precursores proteicos que presentan motivos básicos dobles. Al regular la maduración de factores de crecimiento, receptores, moléculas de adhesión y proteasas, la furina contribuye a la homeostasis de proteínas secretadas y de membrana e influye en vías vinculadas a la remodelación de la matriz extracelular, la señalización inmunitaria y la diferenciación celular. La actividad desregulada de FURIN se ha asociado con una proteostasis alterada y un procesamiento aberrante de componentes de señalización en contextos como la biología del cáncer, la inflamación y la investigación de enfermedades infecciosas. Como nodo central en el procesamiento de proproteínas, FURIN ofrece un punto de entrada mecanístico para estudiar cómo el corte de precursores controla la composición de la superficie celular y las salidas de señalización posteriores.

Las partículas de activación lentiviral Furin (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FURIN en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Furin (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FURIN, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Furin. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FURIN y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.