Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FTα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403920
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FTα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FTα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FTα Anticuerpo (D-5): sc-374262
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FTα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403920 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FNTA codifica la subunidad alfa de la farnesiltransferasa de proteínas (FTα), que forma un heterodímero con FNTB para catalizar la farnesilación de proteínas con el motivo CaaX en el extremo C-terminal. Esta modificación lipídica favorece la asociación a membranas, el tráfico subcelular y las interacciones proteína–proteína de reguladores clave de la señalización, incluidas las GTPasas de la familia RAS y las láminas nucleares. Al controlar la localización y la estabilidad de los sustratos prenilados, FTα contribuye a vías que gobiernan la proliferación, la dinámica del citoesqueleto, el transporte vesicular y las respuestas al estrés. La prenilación desregulada y la señalización aberrante de RAS/láminas se han vinculado con señalización oncogénica, fenotipos de envejecimiento prematuro y otros trastornos en los que se alteran la señalización dependiente de membrana y la arquitectura nuclear.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FTα (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FNTA en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FNTA junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FNTA tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FTα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FNTA para la investigación de la señalización de FTα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FNTA críticos para la función de FTα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FNTA para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FTα CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FTα CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FNTA. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FTα (h) y el plásmido HDR FTα (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FNTA para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FNTA definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.