FSD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406328

Visão geral

FSD1 (fibronectin type III and SPRY domain containing 1) codifica uma proteína citosólica que contém domínios SPRY e semelhantes ao tipo III da fibronectina, sugerindo um papel em interações proteína–proteína e na regulação de complexos de sinalização. Ligações funcionais descritas colocam a FSD1 no controle da organização do citoesqueleto e de processos associados aos microtúbulos, com impactos potenciais na arquitetura celular, no tráfego intracelular e em respostas ao estresse. Alterações de expressão e alterações genômicas envolvendo FSD1 foram observadas em conjuntos de dados de câncer, apoiando seu uso como gene candidato para estudar mecanismos que influenciam proliferação, migração e aptidão celular. Por ser um fator ainda relativamente pouco caracterizado, a FSD1 também é relevante para estudos de descoberta de vias que conectam proteínas de andaime mediadas por domínios a desfechos de sinalização a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FSD1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FSD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FSD1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FSD1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FSD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FSD1 para a investigação da sinalização de FSD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FSD1 críticos para a função FSD1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FSD1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FSD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FSD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FSD1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FSD1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FSD1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FSD1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FSD1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.