Fra2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400250-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Fra2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Fra2 Double Nickase Plasmid (h) e il Fra2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOSL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Fra2 Antibody (G-5): sc-166102
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Fra2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400250-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fra2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400250-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **FOSL2** codifica **Fra2**, un fattore di trascrizione bZIP della famiglia **AP-1** che forma eterodimeri con le proteine **JUN** per regolare l’espressione genica in risposta agli stimoli. Fra2 integra la segnalazione **MAPK/ERK** e **JNK** per controllare proliferazione, differenziamento, rimodellamento della matrice extracellulare e programmi trascrizionali infiammatori. Attraverso la regolazione AP-1–dipendente di citochine, metalloproteinasi e geni associati all’**EMT**, un’alterata attività di FOSL2 è stata collegata alla segnalazione oncogenica, a vie legate alla fibrosi e a disfunzioni immunitarie in molteplici contesti tissutali. Fra2 è quindi ampiamente utilizzata come nodo molecolare per studiare il rimodellamento delle reti trascrizionali a valle di fattori di crescita, segnali di stress e segnali dello sviluppo.
Fra2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOSL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOSL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOSL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOSL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.