Fra2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420403

Übersicht

Fosl2 kodiert Fra2 (FOS-like Antigen 2), einen basischen Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor, der mit JUN-Proteinen dimerisiert und dadurch AP-1-Komplexe bildet, welche die reizabhängige Genexpression steuern. In Mauszellen integriert Fra2 die MAPK/ERK- und JNK-Signalwege, um Programme zu regulieren, die mit Proliferation, Differenzierung, Umbau der extrazellulären Matrix und Stressantworten verknüpft sind. Die Aktivität von Fra2 beeinflusst Linienentscheidungen in Knochen- und Immunzellkompartimenten und moduliert entzündliche Transkriptionsnetzwerke. Eine fehlregulierte AP-1/Fra2-Signalgebung wurde mit pathologischem Remodeling und onkogenen Transkriptionszuständen in Verbindung gebracht, was Fosl2 zu einem geeigneten Knotenpunkt für mechanistische Studien der kontextabhängigen Transkriptionskontrolle macht.

Das Fra2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Fosl2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Fosl2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Fosl2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Fra2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Fosl2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Fra2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Fosl2-Exone abzielen, die für die Fra2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Fosl2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Fra2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Fra2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Fosl2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Fra2 HDR-Plasmid (m) und Fra2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Fosl2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Fosl2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.