FOXM1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-416676-LAC

FOXM1 (forkhead box M1) é um fator de transcrição regulado pelo ciclo celular que coordena a progressão G1/S e G2/M ao controlar a expressão de genes envolvidos na replicação do DNA, na montagem do fuso mitótico, na segregação da cromatina e na citocinese. Ele integra sinalização a montante proveniente de redes ciclina-CDK e de vias de checkpoint, e contribui para a manutenção da estabilidade genômica por meio da regulação de programas associados à resposta a dano no DNA e ao reparo. A expressão desregulada de FOXM1 tem sido associada a fenótipos proliferativos, instabilidade cromossômica e estados de diferenciação alterados em múltiplos contextos de doença humana, incluindo a biologia do câncer. Como um nó central em circuitos transcricionais de proliferação e resposta ao estresse, o FOXM1 é frequentemente estudado em modelos de tumorigênese, programas do tipo “stem-like” e resistência ao estresse genotóxico.

As Partículas de Ativação Lentivirais FOXM1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de FOXM1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais FOXM1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição FOXM1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de FOXM1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo FOXM1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.