FOXF2 Double Nickase Plasmid (h): sc-404367-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das FOXF2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- FOXF2 Double-Nickase-Plasmid (h) und FOXF2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FOXF2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: FOXF2: sc-101043
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
FOXF2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXF2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXF2 (Forkhead-Box F2) kodiert einen Transkriptionsfaktor der Forkhead-Familie, der mesenchymale Differenzierungsprogramme sowie die epithelial–mesenchymale Signalübertragung während der Gewebeentwicklung und -homöostase reguliert. FOXF2 moduliert Gennetzwerke, die mit der Organisation der extrazellulären Matrix, Zellmigration und angiogenem Remodeling verbunden sind, und steht in funktionellem Crosstalk mit Signalwegen wie TGF-β/SMAD und Wnt/β-Catenin, die stromale und vaskuläre Phänotypen prägen. Veränderte FOXF2-Expression oder -Regulationsaktivität wurde mit einer gestörten Entwicklungssteuerung sowie kontextabhängigen Rollen in der Tumorbiologie in Verbindung gebracht, darunter Effekte auf Invasion, metastaseassoziiertes Stroma und das vaskuläre Mikromilieu. Als nukleäres DNA-bindendes Protein wird FOXF2 häufig untersucht, um linienspezifische transkriptionelle Schaltkreise zu kartieren und Gen–Umwelt-Interaktionen zu analysieren, die die Gewebearchitektur beeinflussen.
FOXF2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FOXF2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FOXF2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FOXF2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FOXF2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.