Partículas Lentivirales de Activación (h) Fatty Acid Synthase: sc-400440-LAC

El gen humano **FASN** codifica la **ácido graso sintasa**, un complejo enzimático citosólico multifuncional que cataliza la lipogénesis *de novo* al convertir acetil-CoA y malonil-CoA en ácidos grasos saturados de cadena larga, como el palmitato. Esta actividad se integra con el metabolismo central del carbono, la biosíntesis reductora dependiente de NADPH y la remodelación lipídica para sostener la biogénesis de membranas, la acilación de proteínas y la señalización derivada de lípidos. La función de FASN se interseca con vías de detección de nutrientes y de crecimiento, incluida la señalización PI3K–AKT–mTOR, y está modulada por programas transcripcionales impulsados por SREBP y otros reguladores lipogénicos relacionados. La expresión desregulada de FASN y el aumento del flujo lipogénico se asocian con frecuencia a estados de enfermedad metabólica y a la reprogramación metabólica asociada al cáncer, lo que la convierte en un nodo clave para estudiar el metabolismo lipídico y las transiciones de estado celular.

Las partículas de activación lentiviral Fatty Acid Synthase (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FASN en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Fatty Acid Synthase (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FASN, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Fatty Acid Synthase. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FASN y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.