FAM127B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406247

Descripción general

FAM127B (familia con similitud de secuencia 127, miembro B) codifica una proteína humana escasamente caracterizada y con anotación funcional limitada, lo que la convierte en un objetivo de interés para una interrogación genética sistemática. La evidencia disponible sugiere funciones en la homeostasis celular y en procesos de regulación génica, con posibles conexiones con programas de señalización y transcripción que influyen en la proliferación y las respuestas al estrés. Al igual que otros miembros poco estudiados de la familia FAM, se han reportado alteraciones de expresión o del número de copias en subconjuntos de conjuntos de datos de enfermedades humanas, lo que respalda su investigación en cáncer y otros fenotipos complejos. Desentrañar la función de FAM127B puede ayudar a aclarar su contribución al cableado de vías, al mantenimiento del estado celular y a vulnerabilidades dependientes del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM127B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM127B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM127B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM127B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM127B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM127B para la investigación de la señalización de FAM127B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM127B críticos para la función de FAM127B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM127B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAM127B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAM127B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM127B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM127B (h) y el plásmido HDR FAM127B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM127B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM127B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.