FAAH CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402470

概要

FAAH（脂肪酸アミド加水分解酵素）は膜関連性のセリン加水分解酵素であり、内因性カンナビノイドであるアナンダミドや関連するN-アシルエタノールアミン類を含む生理活性脂肪酸アミドを加水分解することで、それらのシグナル伝達を終結させます。脂質メディエーターの代謝回転を制御することで、FAAHはエンドカンナビノイドトーンを調節し、CB1/CB2受容体シグナル伝達と交差しつつ、下流のcAMP/PKA、MAPK、ならびにカルシウム依存性経路に影響を及ぼします。さらに、FAAHの活性は、細胞ストレス応答や神経伝達を制御するより広範な脂質代謝ネットワークにも作用します。FAAHの発現や機能の変化は、神経炎症や疼痛処理に関わる経路の破綻と関連づけられており、神経精神疾患および代謝表現型の文脈で研究されています。

FAAH CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAAH遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAAH内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAAHのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAAHタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAAHシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAAH欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAAHの機能に不可欠なFAAHエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAAHゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAAH CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAAH CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAAH遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAAH HDRプラスミド（h）および FAAH HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAAHホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAAH標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。