ERRγ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416300

Descripción general

ESRRG codifica el receptor relacionado con el estrógeno gamma (ERRγ), un receptor nuclear huérfano que actúa como factor de transcripción independiente de ligando y regula la biogénesis mitocondrial, la fosforilación oxidativa y la homeostasis energética celular. ERRγ coopera con los coactivadores PGC-1 para controlar programas génicos implicados en la oxidación de ácidos grasos, la actividad del ciclo del TCA y el ensamblaje de la cadena respiratoria, vinculando el control transcripcional con la adaptación metabólica. También participa en programas de diferenciación específicos de tejido, incluidos contextos cardíacos y neuronales, y modula redes de señalización endocrinas y sensibles al estrés. La actividad desregulada de ESRRG/ERRγ se ha asociado con la remodelación metabólica y estados bioenergéticos alterados observados en múltiples modelos relevantes para enfermedades, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en estudios de biología de sistemas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ERRγ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ESRRG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ESRRG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ESRRG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ERRγ.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ESRRG para la investigación de la señalización de ERRγ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ESRRG críticos para la función de ERRγ
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ESRRG para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ERRγ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ERRγ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ESRRG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ERRγ (h) y el plásmido HDR ERRγ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ESRRG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ESRRG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.