20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
El Plásmdo de Activación CRISPR (h) EMILIN-1 es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) EMILIN-1 incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
Los gRNA codificados por el plásmido de activación CRISPR EMILIN-1 (h) y el plásmido de activación CRISPR EMILIN-1 (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas situadas aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción de EMILIN1. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: EMILIN-1 Anticuerpo (C-6): sc-365737