Elongin A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418260

Descripción general

TCEB3C codifica la proteína humana Elongin A3, miembro del complejo factor de elongación de la transcripción Elongin, que favorece la procesividad de la ARN polimerasa II y coordina la transcripción con el control de calidad cotranscripcional. Las proteínas de la familia Elongin interactúan con mecanismos reguladores dependientes de ubiquitina y contribuyen a moldear programas celulares vinculados a respuestas al estrés, proteostasis y control del ciclo celular. Como factor asociado a la transcripción, Elongin A3 es relevante para estudios sobre la regulación de la expresión génica y las vías de señalización ligadas a la cromatina que influyen en la proliferación y la diferenciación. La desregulación de la elongación transcripcional y del control mediado por ubiquitina se implica con frecuencia en la biología oncogénica y neurodegenerativa, lo que convierte a TCEB3C en un locus útil para investigaciones mecanísticas en modelos relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Elongin A3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TCEB3C en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TCEB3C junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TCEB3C tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Elongin A3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TCEB3C para la investigación de la señalización de Elongin A3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TCEB3C críticos para la función de Elongin A3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TCEB3C para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Elongin A3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Elongin A3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TCEB3C. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Elongin A3 (h) y el plásmido HDR Elongin A3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TCEB3C para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TCEB3C definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.