E-cadherin Lentiviral Activation Particles (h): sc-400031-LAC

CDH1はE-カドヘリンをコードしており、E-カドヘリンはカルシウム依存性の細胞間接着性糖タンパク質である。E-カドヘリンは同種分子間相互作用（ホモフィリック相互作用）に加え、カテニンおよびアクチン細胞骨格との連結を介して接着結合（adherens junction）を形成する。上皮構造と頂端–基底極性を安定化することで、E-カドヘリンは細胞運動性を抑制し、Wnt/β-カテニン、Hippo/YAP、受容体型チロシンキナーゼ経路とのクロストークを含む、接触依存的なシグナル伝達を制御する。CDH1の発現量や接着部位での局在の変化は、上皮–間葉系の可塑性、浸潤性表現型、ならびに組織バリアの再構築と広く関連している。そのためCDH1は、ヒト細胞モデルにおける上皮の完全性、接着結合シグナル、腫瘍生物学を研究するうえで中心的な結節点となる。

E-cadherin レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCDH1の発現上昇を可能にします。

E-cadherin レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CDH1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性E-cadherinの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCDH1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。