Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
DUSP22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405867
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DUSP22 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DUSP22, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DUSP22 Anticuerpo (9J2): sc-135602
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DUSP22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405867 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DUSP22 codifica una fosfatasa de doble especificidad que desfosforila residuos de serina/treonina y tirosina para modular redes de señalización impulsadas por quinasas. Está implicada en la regulación de los resultados de la vía MAPK y en el control fosfodependiente de la señalización de receptores inmunitarios, influyendo en programas transcripcionales, estados de activación celular y apoptosis. Al ajustar la dinámica de fosforilación, DUSP22 contribuye a la homeostasis celular en tejidos hematopoyéticos y otros tejidos donde la señalización sensible a estímulos es crítica. La alteración de la expresión de DUSP22 o del contexto de la vía se ha vinculado con señalización inmunitaria desregulada y procesos oncogénicos, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de biología de enfermedades impulsadas por la señalización.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DUSP22 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DUSP22 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DUSP22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DUSP22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DUSP22.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DUSP22 para la investigación de la señalización de DUSP22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DUSP22 críticos para la función de DUSP22
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DUSP22 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DUSP22 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DUSP22 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DUSP22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DUSP22 (h) y el plásmido HDR DUSP22 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DUSP22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DUSP22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.