Plásmido Doble Nickase (h) DTX3L: sc-403953-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DTX3L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DTX3L (h) y el plásmido de doble nickasa DTX3L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DTX3L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DTX3L Anticuerpo (D-10): sc-514776
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DTX3L | sc-403953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DTX3L | sc-403953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (ligasa de ubiquitina E3 deltex 3L) codifica una ligasa de ubiquitina E3 que coopera con PARP9 para regular la ubiquitinación de proteínas en respuesta a la señalización por interferón y al estrés celular. Mediante la modulación del recambio proteico dependiente de ubiquitina y de procesos asociados al daño del ADN, DTX3L influye en las vías de inmunidad innata, la señalización ligada a la cromatina y el mantenimiento de la integridad del genoma. Su actividad se ha relacionado con la regulación de programas transcripcionales inflamatorios y con las respuestas a la infección viral, lo que la hace relevante para estudios de la homeostasis inmunitaria. Se ha descrito una expresión alterada de DTX3L o una activación anómala de su vía en múltiples contextos patológicos, incluidas la señalización asociada al cáncer y la desregulación inmunitaria, lo que respalda su investigación mecanística en modelos de células humanas.
DTX3L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DTX3L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DTX3L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DTX3L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DTX3L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.