DBH CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402441

개요

도파민 베타-하이드록실레이스(DBH)는 구리 의존성 모노옥시게네이스를 암호화하며, 교감신경 뉴런과 부신 크로마핀 세포의 분비 소포 내에서 도파민을 노르에피네프린으로 전환하는 반응을 촉매합니다. DBH는 카테콜아민 생합성을 조절함으로써 아드레날린성 신호전달, 신경내분비성 스트레스 반응, 그리고 심혈관 긴장도와 중추신경계 각성을 조절하는 하위 GPCR 매개 경로에 영향을 미칩니다. DBH의 발현 또는 효소 활성의 변이는 노르에피네프린 항상성 변화와 연관되어 왔으며, 신경정신과적 표현형 및 자율신경계 기능장애의 맥락에서 연구되어 왔습니다. 따라서 DBH는 인간 세포 모델에서 카테콜아민 경로 플럭스, 자극-분비 연계, 신경전달물질 균형을 규명하는 데 유용한 표적입니다.

DBH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DBH 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DBH 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DBH의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DBH 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DBH 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DBH 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DBH 기능에 중요한 DBH 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DBH 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DBH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DBH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DBH 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DBH HDR 플라스미드 (h) 및 DBH HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DBH 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DBH 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.