Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) CSN8: sc-430844-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CSN8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CSN8 (m) y el plásmido de doble nickasa CSN8 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cops8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CSN8 Anticuerpo (C-9): sc-514088
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CSN8 | sc-430844-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cops8 codifica CSN8, una subunidad central del signalosoma COP9 que regula la actividad de las ligasas de ubiquitina tipo cullin–RING mediante la desnedilación, moldeando así el recambio de proteínas dependiente de ubiquitina. Al controlar la estabilidad de reguladores del ciclo celular, factores de respuesta al daño del ADN e intermediarios de señalización, CSN8 ayuda a coordinar la proteostasis, las respuestas al estrés y los programas transcripcionales. En sistemas murinos, la alteración de la función del signalosoma COP9 se ha vinculado con cambios en la homeostasis del desarrollo y defectos específicos de tejido, lo que refleja impactos amplios sobre la proliferación y la apoptosis. Estas funciones hacen de Cops8 un nodo útil para estudiar la interacción cruzada de la vía ubiquitina–proteasoma con redes de señalización como MAPK y NF-κB.
CSN8 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cops8 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cops8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cops8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cops8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.