CSH1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401213

Panoramica

CSH1 codifica l’ormone somatomammotropina corionica 1, un membro della famiglia dell’ormone della crescita/prolattina derivato dalla placenta, che contribuisce alla regolazione endocrina durante la gravidanza. La segnalazione di CSH1 coinvolge vie associate ai recettori delle citochine, tra cui JAK/STAT e i programmi trascrizionali a valle che influenzano la funzione del trofoblasto, la ripartizione dei nutrienti e l’adattamento metabolico materno. L’alterata espressione placentare di CSH1 e di ormoni lattogeni correlati è stata studiata nel contesto di una placentazione compromessa e di fenotipi di crescita fetale deregolata. Di conseguenza, CSH1 è comunemente oggetto di studio nella biologia del trofoblasto, nello sviluppo della placenta e nelle reti di segnalazione endocrina che coordinano le interazioni materno-fetali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CSH1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CSH1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CSH1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CSH1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CSH1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CSH1 per lo studio della segnalazione di CSH1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CSH1 critici per la funzione di CSH1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CSH1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CSH1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CSH1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CSH1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CSH1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CSH1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CSH1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CSH1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.