Crossveinless-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406614
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Crossveinless-2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Crossveinless-2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Crossveinless-2 Anticuerpo (G-8): sc-377502
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Crossveinless-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406614 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BMPER codifica la glicoproteína secretada de la matriz extracelular Crossveinless-2, un regulador dependiente del contexto de la señalización de proteínas morfogenéticas óseas (BMP). Al unirse a ligandos BMP y modular su disponibilidad para los receptores BMP, BMPER influye en programas transcripcionales dependientes de SMAD que controlan el comportamiento endotelial, la morfogénesis tisular y la remodelación de la matriz extracelular. La actividad de BMPER se intersecta con vías del desarrollo y de la homeostasis vascular, y en la literatura se ha vinculado, cuando se altera, con una señalización angiogénica desregulada y fenotipos del tejido conectivo. Estas propiedades hacen de BMPER un objetivo útil para estudiar la formación de gradientes de BMP, el secuestro de ligandos y el ajuste fino de la vía en modelos celulares y de organoides.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Crossveinless-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BMPER en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BMPER junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BMPER tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Crossveinless-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BMPER para la investigación de la señalización de Crossveinless-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BMPER críticos para la función de Crossveinless-2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BMPER para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Crossveinless-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Crossveinless-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BMPER. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Crossveinless-2 (h) y el plásmido HDR Crossveinless-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BMPER para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BMPER definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.