Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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COMMD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404544
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- COMMD1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico COMMD1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: COMMD1 Anticuerpo (B-3): sc-518177
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
COMMD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404544 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
COMMD1 (proteína 1 que contiene el dominio MURR1 del metabolismo del cobre) es una proteína adaptadora multifuncional que regula la señalización dependiente de ubiquitina y el tráfico de membranas, con funciones destacadas en la homeostasis del cobre y el recambio intracelular de proteínas. Modula la actividad transcripcional de NF-κB al influir en la estabilidad y la dinámica nuclear de componentes clave de la vía, afectando así los programas inflamatorios y de respuesta al estrés. COMMD1 también interactúa con la maquinaria de clasificación endosomal y con procesos de transporte iónico, contribuyendo a la fisiología epitelial y hepática. La alteración de la función de COMMD1 se ha relacionado con un manejo desregulado de metales, mayor susceptibilidad al estrés oxidativo y una señalización inflamatoria anómala, aspectos relevantes para estudios de biología hepática, estrés metabólico y redes de señalización asociadas al cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO COMMD1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COMMD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COMMD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COMMD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína COMMD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COMMD1 para la investigación de la señalización de COMMD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de COMMD1 críticos para la función de COMMD1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COMMD1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido COMMD1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido COMMD1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COMMD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR COMMD1 (h) y el plásmido HDR COMMD1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COMMD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COMMD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.