CLEC-2B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425297

Descripción general

Clec1b codifica el receptor de lectina tipo C murino CLEC-2B, una proteína de membrana tipo II implicada en la señalización dependiente de ligando en la superficie celular. Como miembro de la familia de receptores tipo lectina C, CLEC-2B contribuye a la regulación de la comunicación celular relacionada con el sistema inmunitario y el sistema vascular al modular la activación mediada por receptores y las cascadas de fosforilación posteriores. Sus vínculos funcionales con redes de señalización asociadas a plaquetas y con microambientes inflamatorios hacen que Clec1b sea relevante para estudios de hemostasia, interacciones leucocito–endotelio y remodelación tisular. La señalización alterada de receptores de lectinas se investiga con frecuencia en el contexto de la inflamación asociada a trombosis y de patologías impulsadas por el sistema inmunitario utilizando modelos mecanísticos en ratón.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CLEC-2B (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Clec1b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Clec1b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Clec1b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CLEC-2B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Clec1b para la investigación de la señalización de CLEC-2B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Clec1b críticos para la función de CLEC-2B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Clec1b para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CLEC-2B CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CLEC-2B CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Clec1b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CLEC-2B (m) y el plásmido HDR CLEC-2B (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Clec1b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Clec1b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.