CHD1L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404840

Descripción general

CHD1L (proteína 1 similar a la helicasa de unión al ADN con cromodominio) es un remodelador de cromatina dependiente de ATP implicado en la regulación de la accesibilidad del ADN durante la transcripción, las respuestas al estrés de replicación y la reparación del daño en el ADN. A través de su actividad helicasa/ATPasa y de interacciones mediadas por el cromodominio, CHD1L ayuda a coordinar la dinámica de la cromatina que influye en la estabilidad del genoma y la progresión del ciclo celular. Se ha informado de una expresión alterada de CHD1L o de ganancias en el número de copias en múltiples contextos tumorales, y con frecuencia se estudia por sus conexiones con programas transcripcionales oncogénicos, la tolerancia al estrés replicativo y fenotipos invasivos. Estas características hacen de CHD1L una diana relevante para desentrañar el control dependiente de la cromatina de la expresión génica y la elección de vías de reparación del ADN.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CHD1L (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CHD1L en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CHD1L junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CHD1L tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CHD1L.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CHD1L para la investigación de la señalización de CHD1L, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CHD1L críticos para la función de CHD1L
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CHD1L para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CHD1L CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CHD1L CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CHD1L. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CHD1L (h) y el plásmido HDR CHD1L (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CHD1L para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CHD1L definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.