Cerebellin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407032

Visão geral

CBLN1 codifica a cerebelina 1, uma glicoproteína secretada enriquecida no sistema nervoso central que atua como um organizador sináptico, sustentando a formação e a manutenção de sinapses excitatórias. A cerebelina 1 participa de complexos de adesão transsináptica que acoplam especializações pré-sinápticas e pós-sinápticas, moldando a conectividade sináptica e a neurotransmissão no cerebelo e em circuitos relacionados. Por meio dessas interações, influencia o desenvolvimento neuronal, a plasticidade sináptica e processos de refinamento de circuitos centrais para a coordenação motora e a aprendizagem. Alterações na expressão de CBLN1 ou a desorganização sináptica mediada por cerebelina têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de sinaptopatias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cerebellin 1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CBLN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CBLN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CBLN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cerebellin 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CBLN1 para a investigação da sinalização de Cerebellin 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CBLN1 críticos para a função Cerebellin 1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CBLN1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Cerebellin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Cerebellin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CBLN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Cerebellin 1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Cerebellin 1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CBLN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CBLN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.