CEACAM1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-417666-LAC

CEACAM1 (molécula de adesão celular 1 relacionada ao antígeno carcinoembrionário) é um receptor da superfamília das imunoglobulinas expresso em células epiteliais, células endoteliais e em vários subtipos de leucócitos, onde medeia a adesão célula–célula e a sinalização dependente de contacto. Por meio de motivos ITIM citoplasmáticos e de interações com quinases da família Src e fosfatases como SHP-1/SHP-2, o CEACAM1 modula vias que controlam a sinalização de recetores imunitários, a função de barreira, a apoptose e o metabolismo celular. O CEACAM1 contribui para a regulação das respostas imunitárias inata e adaptativa, incluindo sinalização inibitória em células T e células NK, e influencia programas angiogénicos e inflamatórios em microambientes tecidulares. A expressão ou sinalização desregulada de CEACAM1 tem sido associada a alterações na vigilância imunitária, mecanismos de doença inflamatória e fenótipos relacionados com o cancro, sustentando a sua utilização como um nó mecanístico em estudos de imunologia tumoral e biologia epitelial.

As Partículas de Ativação Lentivirais CEACAM1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CEACAM1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CEACAM1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CEACAM1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CEACAM1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CEACAM1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.