Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Cdc20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400583
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdc20 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Cdc20, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdc20 Anticorpo (E-7): sc-13162
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdc20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400583 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDC20 codifica a Cdc20, um coativador essencial do complexo promotor da anáfase/ciclossoma (APC/C), que controla a transição de metáfase para anáfase ao promover a degradação, dependente de ubiquitina, de reguladores mitóticos-chave. Sua atividade é regulada pelo checkpoint de montagem do fuso por meio de complexos inibitórios com proteínas como MAD2 e BUBR1, assegurando a segregação cromossômica correta e a saída oportuna da mitose. A desregulação de CDC20 compromete a fidelidade do checkpoint, impulsiona instabilidade cromossômica e aneuploidia e é frequentemente associada a fenótipos proliferativos na biologia do câncer. Como um nó central no controle do ciclo celular, a Cdc20 é comumente estudada em vias que envolvem a sinalização do APC/C, a dinâmica ubiquitina–proteassoma e o controle do checkpoint mitótico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cdc20 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDC20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDC20, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDC20 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cdc20.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDC20 para a investigação da sinalização de Cdc20, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDC20 críticos para a função Cdc20
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDC20 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Cdc20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Cdc20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDC20. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Cdc20 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Cdc20 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDC20 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDC20 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.