CD7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407287

Übersicht

CD7 kodiert einen transmembranen Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der vorwiegend auf Thymozyten und reifen T‑Zellen exprimiert wird. Dort ist er an der Aktivierung von T‑Zellen, an Adhäsion sowie an der Organisation der immunologischen Synapse beteiligt – über Interaktionen, die Signalisierungsschwellen modulieren. Die CD7-assoziierte Signalübertragung greift in SRC-Familien-Kinasen- und MAPK-gekoppelte Signalwege ein, die die T‑Zell-Differenzierung, Zytokinantworten und zytotoxische Effektor-Funktionen prägen. Eine veränderte CD7-Expression wird in der Lymphozytenbiologie häufig als immunphänotypisches Merkmal genutzt und im Kontext von Modellen für T‑Zell-Malignome und Immunfehlregulation untersucht. Als Oberflächenmarker mit funktionellen Signalrollen stellt CD7 einen gut zugänglichen Angriffspunkt dar, um T‑Zellrezeptor-nahe Signalnetzwerke und Linien-/Differenzierungsprogramme zu analysieren.

Das CD7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CD7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CD7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CD7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CD7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CD7-Exone abzielen, die für die CD7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CD7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CD7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CD7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD7 HDR-Plasmid (h) und CD7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CD7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CD7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.