Plasmide Double Nickase (h) CD43: sc-402688-NIC

SPN code pour CD43 (leucosialine), une sialomucine fortement O‑glycosylée exprimée sur la plupart des cellules hématopoïétiques, qui régule l’adhésion, la migration et l’activation des leucocytes. CD43 module l’architecture de la synapse immunologique et les interactions cellule‑cellule en influençant l’adhésion dépendante des intégrines, la dynamique du cytosquelette et la signalisation en aval des récepteurs de l’antigène dans les lymphocytes T et B. Par ses effets sur le trafic cellulaire et les seuils d’activation, CD43 contribue aux réponses inflammatoires et à l’homéostasie immunitaire au sein des lignées myéloïdes et lymphoïdes. Une expression de CD43 altérée ou une composition en glycoformes modifiée est fréquemment évaluée dans les recherches sur la dérégulation immunitaire et les hémopathies malignes, comme marqueur associé à l’état de différenciation et à une signalisation aberrante.

CD43 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SPN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SPN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SPN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SPN.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.