Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD27L (m): sc-423453
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD27L Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD27L, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD27L Antibody (G-7): sc-365539
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD27L (m) | sc-423453 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cd70 code pour CD27L (CD70), un ligand membranaire de type II de la superfamille du TNF qui se lie à CD27 sur les lymphocytes T, les lymphocytes B et les cellules NK afin de moduler la signalisation co‑stimulatrice. Les interactions CD27–CD70 façonnent l’activation de l’immunité adaptative, en favorisant l’expansion, la survie et la différenciation des lymphocytes via des programmes transcriptionnels en aval liés à NF‑κB et aux MAPK. La régulation stricte de l’expression de CD70 sur les cellules présentatrices d’antigène activées contribue à maintenir l’équilibre entre l’amorçage de la réponse immunitaire et l’homéostasie immunitaire. Une signalisation CD70 dérégulée a été impliquée dans des réponses inflammatoires aberrantes, une dynamique altérée des centres germinatifs et une dysrégulation immunitaire pertinente pour la recherche sur l’auto-immunité et l’immunobiologie des cancers.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD27L (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd70 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd70, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd70 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD27L.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd70 pour l'étude de la signalisation de CD27L, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cd70 essentiels à la fonction de CD27L
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd70 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD27L plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD27L plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd70. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD27L plasmide HDR (m) et le CD27L (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd70 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd70 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.