CD151 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419532

Descripción general

Cd151 codifica CD151, una tetraspanina que organiza microdominios de membrana y modula la adhesión, la migración y la señalización dependientes de integrinas. CD151 se asocia con integrinas de unión a laminina como α3β1 y α6β1/β4 para influir en la dinámica de las adhesiones focales, la remodelación del citoesqueleto y vías downstream, incluidas PI3K–AKT y MAPK. En sistemas murinos, la actividad de CD151 contribuye a la integridad epitelial, el comportamiento angiogénico y el tráfico de células inmunitarias, vinculándola con procesos relevantes para la invasión del cáncer, la fibrosis y la remodelación tisular inflamatoria. Su papel en las interacciones con la matriz extracelular también la convierte en un nodo útil para estudiar la organización de la membrana basal y la comunicación célula–célula.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD151 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd151 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd151 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd151 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD151.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd151 para la investigación de la señalización de CD151, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cd151 críticos para la función de CD151
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd151 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CD151 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD151 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd151. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD151 (m) y el plásmido HDR CD151 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd151 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd151 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.