Ccr1l1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419703

Descripción general

Ccr1l1 codifica una proteína relacionada con los receptores de quimiocinas tipo CCR1, prevista para participar en el tráfico leucocitario y en redes de señalización inflamatoria que, por lo general, están gobernadas por ejes de quimiocinas acoplados a receptores acoplados a proteína G (GPCR). Aunque está menos caracterizado que los miembros canónicos de la familia CCR, Ccr1l1 está en posición de influir en la migración dirigida por quimiocinas, la localización de células inmunitarias y vías posteriores vinculadas a la remodelación de actina y a la regulación de circuitos de citocinas/quimiocinas. Estos procesos son fundamentales para las respuestas inmunitarias innata y adaptativa y con frecuencia se implican en modelos de enfermedad inflamatoria, infección y dinámica del microambiente tumoral-inmunitario. Por lo tanto, Ccr1l1 en ratón constituye un punto de partida útil para explorar in vivo, y en sistemas de células primarias, la biología adyacente a los receptores de quimiocinas y los mecanismos de inmunorregulación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ccr1l1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ccr1l1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ccr1l1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ccr1l1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ccr1l1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ccr1l1 para la investigación de la señalización de Ccr1l1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ccr1l1 críticos para la función de Ccr1l1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ccr1l1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ccr1l1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Ccr1l1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ccr1l1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ccr1l1 (m) y el plásmido HDR Ccr1l1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ccr1l1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ccr1l1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.