CASZ1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404756-NIC

CASZ1 (castor zinc finger 1) codifica un fattore di trascrizione nucleare a dita di zinco che regola programmi di espressione genica dello sviluppo, controllando decisioni sul destino cellulare, differenziamento e patterning dei tessuti. Nelle cellule umane, CASZ1 influenza reti trascrizionali legate a processi cardiaci e di neurosviluppo e può modulare vie che governano proliferazione e impegno di linea. Un’espressione alterata di CASZ1 o la sua perturbazione genomica sono state associate alla biologia del neuroblastoma e ad altri contesti in cui è compromesso il controllo trascrizionale di crescita e differenziamento. In quanto regolatore che si lega al DNA, CASZ1 rappresenta un nodo sperimentale accessibile per studiare come la logica cis-regolatoria e il dosaggio dei fattori di trascrizione plasmino fenotipi normali e rilevanti per la malattia.

CASZ1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CASZ1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CASZ1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CASZ1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CASZ1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.