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CARM1慢病毒激活颗粒(h) | sc-404087-LAC | 200 µl | $455.00 |
CARM1(与共激活子相关的精氨酸甲基转移酶1;PRMT4)是一种蛋白质精氨酸甲基转移酶,可催化组蛋白H3(如H3R17/H3R26)以及多种非组蛋白底物的非对称二甲基化,从而调控转录、RNA加工和染色质结构。通过与核受体和转录因子的共激活作用,CARM1影响细胞周期推进、分化、DNA损伤应答以及信号依赖的基因表达等调控程序。CARM1介导的甲基化与涉及p300/CBP、SWI/SNF染色质重塑以及转录延伸复合物的表观遗传通路相互交织,从而塑造谱系特异性与应激响应性的转录。CARM1活性与表达的失调与致癌性转录网络及细胞可塑性改变相关,因此在癌症生物学与激素应答信号研究中具有重要意义。
CARM1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CARM1 表达。
CARM1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CARM1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CARM1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CARM1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。