CARD 6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-413684

Panoramica

CARD6 (caspase recruitment domain family member 6) è una proteina adattatrice umana contenente un dominio CARD, implicata nella segnalazione dei recettori di riconoscimento dei pattern e nella modulazione delle risposte infiammatorie. Attraverso interazioni proteina–proteina mediate dal dominio CARD, CARD6 è stata associata alla regolazione dell’attività delle vie NF-κB e MAPK a valle del riconoscimento microbico e di segnali di stress, influenzando la produzione di citochine e l’attivazione dell’immunità innata. Alterazioni nella segnalazione di CARD6 sono state discusse nel contesto di infiammazione disregolata e di fisiopatologia associata al sistema immunitario, rendendola rilevante per studi meccanicistici sulla difesa dell’ospite e sulle reti di segnalazione infiammatoria.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CARD 6 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CARD6 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CARD6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CARD6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CARD 6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CARD6 per lo studio della segnalazione di CARD 6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CARD6 critici per la funzione di CARD 6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CARD6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CARD 6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CARD 6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CARD6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CARD 6 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CARD 6 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CARD6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CARD6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.