CaM III CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400953

개요

CALM3는 칼모듈린 III(CaM III)를 암호화하며, Ca2+를 감지하는 고도로 보존된 센서로서 CaM 의존성 키나아제와 포스파테이스, 이온 채널, 세포골격 구성요소 등을 포함한 수많은 효과 단백질에 결합해 이를 조절합니다. CaM III는 세포 내 칼슘 신호의 일시적 변동을 효소 활성 변화로 전환함으로써 흥분–수축 연결, 소포 수송, 전사 조절, 세포주기 진행과 같은 핵심 과정들을 뒷받침합니다. CALM3 의존성 신호전달은 CaMK 및 칼시뉴린/NFAT 등을 포함한 경로들과 연결되어 자극 반응성 유전자 발현과 세포 스트레스 적응을 형성합니다. 조절 이상이 생긴 칼슘/칼모듈린 신호전달은 심혈관 및 신경계 맥락에서의 병적 리모델링과 연관되어 있어, CALM3의 교란은 Ca2+ 구동 표현형의 기전 연구에 유용합니다.

CaM III CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CALM3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CALM3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CALM3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CaM III 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CaM III 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CALM3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CaM III 기능에 중요한 CALM3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CALM3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CaM III CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CaM III CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CALM3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CaM III HDR 플라스미드 (h) 및 CaM III HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CALM3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CALM3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.