cadherin-24 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401990

Descripción general

CDH24 codifica la cadherina-24, una proteína de adhesión célula–célula dependiente de calcio que contribuye a la organización del tejido epitelial al sostener la integridad de las uniones adherentes y la señalización dependiente del contacto. A través de interacciones mediadas por cadherinas con las cateninas y el citoesqueleto de actina, la cadherina-24 influye en procesos como la polaridad celular, la función de barrera y la migración celular coordinada. Los patrones desregulados de expresión de cadherinas pueden alterar la cohesión intercelular y las redes de señalización vinculadas al remodelado epitelial y a fenotipos asociados con la invasión. Por ello, CDH24 es de interés para estudiar la regulación de la arquitectura tisular dependiente de la adhesión y los cambios relevantes para la enfermedad en el comportamiento celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO cadherin-24 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDH24 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDH24 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDH24 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína cadherin-24.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDH24 para la investigación de la señalización de cadherin-24, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CDH24 críticos para la función de cadherin-24
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDH24 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido cadherin-24 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido cadherin-24 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDH24. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR cadherin-24 (h) y el plásmido HDR cadherin-24 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDH24 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDH24 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.