C17orf96 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408662

Descripción general

EPOP (C17orf96) codifica un factor asociado a la cromatina que actúa como componente del complejo represor Polycomb 2 (PRC2), apoyando el silenciamiento génico epigenético mediante la regulación de la metilación de H3K27 en loci diana. Al conectar PRC2 con proteínas auxiliares, C17orf96 ayuda a coordinar programas de represión transcripcional que moldean la identidad celular, la diferenciación y la expresión génica durante el desarrollo. La desregulación de los represores asociados a PRC2 y de los paisajes de H3K27me3 se implica con frecuencia en estados transcripcionales oncogénicos y en otros trastornos con control alterado de la cromatina. En consecuencia, EPOP se estudia en el contexto del remodelado de la cromatina, la especificación de linaje y la represión aberrante de genes supresores de tumores y de diferenciación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C17orf96 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen EPOP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del EPOP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de EPOP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C17orf96.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en EPOP para la investigación de la señalización de C17orf96, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de EPOP críticos para la función de C17orf96
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de EPOP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C17orf96 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido C17orf96 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus EPOP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C17orf96 (h) y el plásmido HDR C17orf96 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología EPOP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana EPOP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.