Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
BRD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406252
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BRD1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BRD1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BRD1 Anticuerpo (F-12): sc-398226
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BRD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406252 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BRD1 (bromodomain containing 1) humano es un regulador asociado a la cromatina que reconoce residuos de lisina acetilada en las colas de histonas mediante su bromodominio, vinculando la acetilación de histonas con el control transcripcional. BRD1 participa en programas epigenéticos que moldean la expresión génica durante el desarrollo y la diferenciación celular, incluida la regulación de la actividad de promotores y potenciadores (enhancers) a través de la remodelación de la cromatina y el reclutamiento de correaguladores. Al modular redes de transcripción conectadas con vías neuronales e inmunitarias, BRD1 se ha estudiado en el contexto de estados alterados de expresión génica relevantes para trastornos neuropsiquiátricos y otros trastornos complejos y poligénicos. Su papel en la interfaz entre la acetilación de histonas y la transcripción convierte a BRD1 en una diana útil para desentrañar mecanismos dependientes de la cromatina que influyen en la identidad celular y en las respuestas al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BRD1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BRD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BRD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BRD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BRD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BRD1 para la investigación de la señalización de BRD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BRD1 críticos para la función de BRD1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BRD1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BRD1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BRD1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BRD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BRD1 (h) y el plásmido HDR BRD1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BRD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BRD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.