Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Bob 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400771
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Bob 1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Bob 1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Bob 1 Anticorpo (6F10): sc-23932
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Bob 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400771 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
POU2AF1 (Bob 1/OBF-1) é um coativador transcricional restrito a células B que se liga a OCT1/POU2F1 e OCT2/POU2F2 para potencializar a transcrição de genes de imunoglobulinas e programas mais amplos de expressão gênica em células B. Ele sustenta respostas de centro germinativo, recombinação de troca de classe (class-switch) e a diferenciação em plasmócitos ao integrar a atividade de enhancers em motivos octâmero com sinais que modulam a ativação e a sobrevivência das células B. Expressão desregulada de POU2AF1 e o circuito transcricional associado foram relatados em neoplasias de células B, incluindo linfomas e leucemias, e em fenótipos imunológicos ligados a alterações nas respostas humorais. Assim, Bob 1 é comumente estudado em vias que controlam a identidade das células B, a maturação induzida por antígeno e a regulação transcricional de genes efetores do sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Bob 1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene POU2AF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do POU2AF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do POU2AF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Bob 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de POU2AF1 para a investigação da sinalização de Bob 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) POU2AF1 críticos para a função Bob 1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos POU2AF1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Bob 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Bob 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus POU2AF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Bob 1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Bob 1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia POU2AF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo POU2AF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.