BMPR-IA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400581-KO-2

Descripción general

BMPR1A codifica el receptor de proteína morfogenética ósea tipo IA (BMPR-IA), un receptor cinasa de serina/treonina que se une a ligandos BMP e inicia la señalización canónica mediada por SMAD1/5/9, así como vías no canónicas de MAPK. A través de estas cascadas, BMPR-IA regula la especificación del destino celular, la proliferación, la diferenciación y la morfogénesis tisular, con funciones destacadas en programas osteogénicos y en la homeostasis epitelial. La alteración de la señalización de BMPR1A se ha implicado en anomalías del desarrollo y en procesos relevantes para el cáncer mediante una actividad desregulada de la vía BMP/TGF-β, incluidos efectos sobre la dinámica de las células madre y el control del crecimiento. Por ello, BMPR1A se estudia ampliamente en contextos como el compromiso de linaje, la biología de organoides y la interacción entre vías de transducción de señales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BMPR-IA (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BMPR1A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BMPR1A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BMPR1A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BMPR-IA.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BMPR1A para la investigación de la señalización de BMPR-IA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de BMPR1A críticos para la función de BMPR-IA
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BMPR1A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BMPR-IA CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BMPR-IA CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BMPR1A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BMPR-IA (h) y el plásmido HDR BMPR-IA (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BMPR1A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BMPR1A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.