Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Bcl-w Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402639
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Bcl-w El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Bcl-w, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Bcl-w Anticuerpo (2E4): sc-293236
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Bcl-w Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402639 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BCL2L2 codifica Bcl-w, un miembro antiapoptótico de la familia BCL-2 que preserva la integridad de la membrana externa mitocondrial al frenar efectores proapoptóticos como BAX y BAK. A través del control de la apoptosis mitocondrial, Bcl-w influye en las decisiones de muerte celular intrínseca en respuesta a la privación de factores de crecimiento, el daño del ADN y el estrés oxidativo, modulando la supervivencia celular, la adaptación al estrés y la homeostasis tisular. La actividad de BCL2L2 se entrecruza con vías que regulan la dinámica mitocondrial y las señales de supervivencia, incluidas entradas asociadas a PI3K/AKT y MAPK que convergen en el equilibrio de la familia BCL-2. La expresión desregulada de Bcl-w se ha asociado con umbrales apoptóticos alterados y fenotipos de supervivencia relevantes para la oncogénesis y la respuesta al tratamiento en múltiples contextos tumorales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Bcl-w (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BCL2L2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BCL2L2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BCL2L2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Bcl-w.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BCL2L2 para la investigación de la señalización de Bcl-w, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BCL2L2 críticos para la función de Bcl-w
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BCL2L2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Bcl-w CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Bcl-w CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BCL2L2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Bcl-w (h) y el plásmido HDR Bcl-w (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BCL2L2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BCL2L2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.