AVP Receptor V1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401691

Visão geral

AVPR1A codifica o receptor V1a de vasopressina arginina, um GPCR do tipo rodopsina que se acopla principalmente a Gq/11 para ativar a fosfolipase C, gerando sinais de IP3/DAG que elevam o Ca²⁺ intracelular e estimulam programas transcricionais dependentes de PKC. A sinalização do receptor V1a regula a contração do músculo liso vascular, a responsividade plaquetária, a glicogenólise hepática e circuitos neuromodulatórios envolvidos em comportamentos sociais e relacionados ao estresse. Nas células, a atividade de AVPR1A interage com a sinalização MAPK/ERK, com a regulação gênica dependente de cálcio e com a remodelação do citoesqueleto, que influenciam a contratilidade e a migração. A desregulação da sinalização vasopressina–V1a tem sido investigada em fenótipos cardiovasculares e metabólicos e em associações com traços neuropsiquiátricos, apoiando estudos mecanísticos da função do receptor em diferentes contextos teciduais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AVP Receptor V1a (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AVPR1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AVPR1A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AVPR1A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AVP Receptor V1a.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AVPR1A para a investigação da sinalização de AVP Receptor V1a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AVPR1A críticos para a função AVP Receptor V1a
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AVPR1A para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo AVP Receptor V1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo AVP Receptor V1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AVPR1A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo AVP Receptor V1a Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR AVP Receptor V1a (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AVPR1A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AVPR1A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.