ASPP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423473

Descripción general

Ppp1r13b codifica ASPP1, una proteína estimuladora de la apoptosis que se une al dominio de unión al ADN de los factores de transcripción de la familia p53 y orienta su actividad hacia genes diana proapoptóticos. Mediante la modulación de la transcripción dependiente de p53/p63/p73, ASPP1 contribuye a la apoptosis inducida por estrés, al control del ciclo celular y al mantenimiento de la integridad genómica. La función de ASPP1 se interseca con la señalización de la respuesta al daño del ADN y con redes de correceptores transcripcionales que determinan decisiones sobre el destino celular. La regulación alterada de este eje es relevante para la biología tumoral y otras afecciones en las que la apoptosis defectuosa y el control de puntos de control contribuyen a fenotipos celulares asociados a la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ASPP1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ppp1r13b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ppp1r13b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ppp1r13b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ASPP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ppp1r13b para la investigación de la señalización de ASPP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ppp1r13b críticos para la función de ASPP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ppp1r13b para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ASPP1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ASPP1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ppp1r13b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ASPP1 (m) y el plásmido HDR ASPP1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ppp1r13b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ppp1r13b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.