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Aquaporin 4/AQP4双切口酶质粒(h) | sc-400258-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aquaporin 4/AQP4双切口酶质粒(h2) | sc-400258-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 AQP4 基因编码水通道蛋白-4(aquaporin-4),是一种主要的水通道,富集于星形胶质细胞的终足部位,支持水分子快速、双向跨越质膜转运,并有助于维持脑内水分稳态。AQP4 通过与离子通量和神经递质传递相耦联,参与星形胶质细胞体积调控、细胞外空间动态变化以及类淋巴(glymphatic)转运过程,从而影响间质溶质的清除。其膜上的极性定位由血管周围的支架蛋白复合体协同组织,并与血脑屏障生理功能及渗透压应激反应密切相关。AQP4 的表达水平或定位发生失调与神经炎症和脱髓鞘性疾病、脑水肿以及癫痫易感性改变有关,因此它是研究中枢神经系统液体平衡机制与胶质生物学的重要靶点。
Aquaporin 4/AQP4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AQP4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AQP4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AQP4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AQP4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。