Plasmide CRISPR/Cas9 KO Apelin (h): sc-401548
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Apelin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Apelin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Apelin Antibody (2A1-2D5): sc-293441
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Apelin (h) | sc-401548 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
APLN code l’apéline, un ligand peptidique sécrété du récepteur APJ (APLNR) qui régule l’homéostasie cardiovasculaire, l’angiogenèse, l’équilibre hydrique et la signalisation métabolique. L’interaction apéline–APJ active des voies dépendantes des RCPG, notamment PI3K/AKT, ERK/MAPK et AMPK, influençant la migration endothéliale, le tonus vasculaire et l’utilisation de l’énergie cellulaire. Dans les tissus humains, l’expression de l’apéline répond à l’hypoxie et aux signaux inflammatoires et est fréquemment étudiée dans le contexte du remodelage vasculaire et de la biologie du tissu adipeux. Une signalisation APLN dérégulée a été associée à des phénotypes cardiométaboliques, à des dysfonctionnements vasculaires pulmonaires et systémiques, ainsi qu’à des processus du microenvironnement tumoral tels que la néovascularisation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Apelin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène APLN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du APLN, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert APLN à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Apelin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en APLN pour l'étude de la signalisation de Apelin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de APLN essentiels à la fonction de Apelin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de APLN pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Apelin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Apelin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus APLN. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Apelin plasmide HDR (h) et le Apelin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie APLN pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles APLN définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.