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Annexin VI双切口酶质粒(h) | sc-401791-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin VI双切口酶质粒(h2) | sc-401791-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 ANXA6 基因编码膜联蛋白 VI(annexin VI),这是一种 Ca2+ 依赖的磷脂结合支架蛋白,可与细胞膜内侧脂双层结合,协调膜转运、胞吐/胞吞以及细胞骨架动力学。膜联蛋白 VI 参与钙信号传导和膜微区组织,影响受体周转以及依赖受控囊泡运输的信号转导通路。由于其在内体分选以及膜-细胞骨架耦联中的作用,它还与胆固醇稳态和细胞迁移等过程相关。已有研究在包括肿瘤生物学和心血管相关细胞表型等背景中报道 ANXA6 的表达或定位发生改变,因此它对解析依赖膜的信号网络机制研究具有重要意义。
Annexin VI 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ANXA6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ANXA6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ANXA6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ANXA6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。